IEC-6大鼠小肠隐窝上皮细胞
1）来源：大鼠小肠
2）形态：上皮细胞样，贴壁生长
3）含量：>1x106个/mL
4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
细胞来源描述：
大鼠小肠隐窝上皮细胞主要来源于小肠的上皮组织。小肠是消化道的一部分，由十二指肠、空肠和回肠组成。其中，小肠的上皮组织由多种细胞类型组成，包括隐窝上皮细胞、吸收细胞、杯状细胞等。
隐窝上皮细胞是小肠上皮中z常见的细胞类型之一。它们位于小肠黏膜的隐窝区域，形成了许多腺体样的结构，被称为小肠隐窝。隐窝上皮细胞具有分泌黏液和素有保护作用的功能。
注：该细胞表达肠上皮特有抗原。氢化可的松可抑制该细胞的生长。（该细胞体外倍增次数有限，请使用靠前批次于实验）
IEC-6大鼠小肠隐窝上皮细胞4倍镜下成像
以下是详细的IEC-6细胞培养技巧，包括操作步骤、培养条件、细胞复苏、传代和冻存等操作步骤：
一.IEC-6细胞的培养基配制：
-培养基可以使用DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）或RPMI-1640培养基，添加10%胎牛血清（FBS）。
-在培养基中加入10ug/ml胰岛素，胰岛素是无血清哺乳动物细胞培养基中的普遍添加物质，在许多细胞活动中发挥重要作用：如促进糖和氨基酸转运，提高合成代谢降低分解代谢，刺激细胞生长等等
DMEM+10%胎牛血清+1%P/S+10ug/ml胰岛素
注意:
①低温保存的细胞非常脆弱，请将冻存管放入37C的水中解冻，尽快复苏细胞。
②提前室温预热培养基。
1.在无菌区准备好15ml离心管和T-25培养瓶并分别加入5ml完全培养基;
2.将冻存管放入37C水浴锅中，握住冻存管不停晃动，直到内容物完全融化。然后立即将冻存管从水浴中取出，擦干并喷洒75%乙醇，移至无菌区;
3.小心地拆卸盖子，不要碰到里面的螺纹，用移液枪轻轻吸出细胞悬液，加入到准备好的15ml离心管中，1000rpm离心5min;
4.弃上清后，轻弹离心管底部分散细胞沉淀，加入适量完全培养基重悬细胞后转入准备好的T25培养瓶(建议加液量:5~7ml);
5.轻轻摇动培养瓶使细胞均匀分布，如有必要(如使用不透气瓶)，松开阀盖，以便气体交换
6.将培养瓶放入CO培养箱中培养
三.细胞培养条件：
-在37°C的恒温培养箱中培养细胞。
-维持细胞的湿度和合适的CO2浓度（通常为5%）。
四.细胞传代：
1、细胞未长至85%时，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到生物操作台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，若培养瓶上无特殊标注，吸去剩余培养液，只留6-8ml培养液继续培养。
细胞已长满达85-95%。即可进行传代，具体步骤如下:
1.弃去培养液，用PBS洗涤1-2次;
2.加入1.0m胰酶消化液，37C消化约10min(消化时间根据不同细胞及所用胰酶有所差异)，显微镜下观察细胞消化情况，若细胞回缩变圆、透亮、轻拍瓶壁呈流沙样脱落，则迅速拿回操作台，加入至少双倍的含10%血清的完全培养液，终止消化并轻轻吹打细胞.使其变成单细胞悬液;
3.将细胞收集于离心管中离心1000rmp/5min，弃上清，轻弹管底，将细胞弹散:4.加入新鲜培养基重悬细胞，进行传代;5.如果没有特别说明，建议收到细胞后的第一次传代比例为1:2。
注:①观察细胞密度z好用(4X物)观察，以确的断胞密度，观察细胞形态请用(10X或20X)高倍镜观察。①.推荐使用0.25%胰酶EDTA消化液。③.瓶中运输的培养液不能重复使用，请换新鲜培养液培养。④.有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心重后接种到新瓶内。
5.细胞冻存：
-当细胞达到合适的传代次数时，可以进行冻存以备将来使用。
-使用合适的冻存培养基，含有10%二甲基亚砜（DMSO）和10%胎牛血清。
-缓慢添加冻存培养基到细胞培养皿中，使细胞逐渐适应冻存液的浓度。
-将细胞悬浮液分装到冻存管中，并在-80°C或液氮罐中冷冻保存。
请注意，IEC-6细胞的培养条件和技术可能因实验室和研究要求的不同而有所变化。因此，在进行细胞培养之前，建议参考相关的研究文献和实验室指南，以确保您的实验符合特定的要求和z佳实践。
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